肉的宰后嫩化大部分归因于肌原氯纶板机构的破碎，肌原氯纶板机构是由内源性核核蛋清酶油脂电离酶生物降解塑料肌原氯纶板和神经组织神经上皮细胞核骨架核核蛋清酶会导致的。与一百多年来直到是留意热点的钙核核蛋清酶酶的不同，胱天核核蛋清酶酶（caspases）近两天作为感需求的话语题。胱天核核蛋清酶酶在神经组织神经上皮细胞核凋亡的执行力阶段中起着至关为重要的功用，这之中caspase-3在临死前核核蛋清酶油脂电离中的功用是供需双方便和很复杂的，往往最该进一次实验。S-亚硝基化凭借调试钙解放、热量组织神经上皮细胞代谢、核核蛋清酶质生物降解塑料和神经组织神经上皮细胞核凋亡来调试肉嫩，主要包括嫩度和持水程度。后期实验挖掘S-亚硝基化需要上涨依赖性线粒体的caspase-3级联不良反应，这可能会是脂肪神经组织神经上皮细胞核凋亡和牛肉片产品的变化的理由。caspase-3的实验关键点是其与神经组织神经上皮细胞核凋亡的内在联系，不过，比较少有实验研究方案S-亚硝基化调试caspase-3的工作机制。

2024年9月由合肥种植业综合大学张万刚讲师微商团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物制品为该研究提供了亚硝基化突显组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

英文版标题格式：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202四年反应系数：5.7

发表论文时：2024年9月

客服方：南京农业大学

学习建筑材料：蛋白

拜谱提供了新技术：亚硝基化修饰组学

技术性风格：

一、探索报告

01.Caspase-3吸附性

现下尚不知道NO对caspase-3的阻止目的可否归因于NO介导的S-亚硝基化，各种不同密度梯度方向的GSNO算作外源性NO生产商，以诱发caspase-3的离体S-亚硝基化。成果发现，与没能GSNO的组相较于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性氧强势消减（图1），与已经报道怎么写同一。GSNO清理消减caspase-3可溶性氧的自身主观原因仍尚需表明。

图1 不同于盐浓度的GSNO补救对caspase-3抗逆性的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化数量

探究Caspase-3的亚硝基化层面，以阐释GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO整理后，在线加测到caspase-3蛋白酶S-亚硝基化承载力曾加（图2）。这可是显示，外源性GSNO培养出可胜利引发caspase-3的身体之外S-亚硝基化。更让人震惊的是，在也没有GSNO有着的照表组中在线加测到其中一个忽闪的S-亚硝基化带，这显示caspase-3会出现内源性的S-亚硝基化。还有就是，本探究中caspase-3的S-亚硝基化层面较高，而caspase-3的化学活化降底，这与先前的探究一样。不过，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化表达位点尚不清除，还所需进第一步的挑战。

图2 GSNO治理 对caspase-3S-亚硝基化平行的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化遮盖组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。海蓝标志的字段觉得法S-亚硝基化肽，橘红色标志的C觉得法S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3挥发结球蛋白

结血清为一些核心的受损肿瘤细胞骨架血清，在确保肌受损肿瘤细胞格局的格局齐全性和抽缩性多方面起着核心影响，论述S-亚硝基化caspase-3对结血清分解的太比较敏感和理性享有核心寓意。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的默认值肌合成纤维棉血清）组相比之下，0 μM GSNO组（肌原合成纤维棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的齐全结血清含水量相关性减轻，提示卡caspase-3对结血清享有暗藏的血清电离意识。在GSNO孵育后，齐全结血清的含水量非常明显上升（P < 0.05）。另外，当GSNO氨水浓度提升时，齐全结血清的含水量持续性上涨（P < 0.05）（图5）。此感觉揭示，SNO修饰语的caspase-3以水准依赖关系的原则促使结血清的分解。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3可降解肌钙核蛋白-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清调整复杂腿部肌肉收縮的细细的的也要肌原黏胶仟维板蛋清。TnT的光可化学生物降解塑料特证是测试到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化必备条件下，caspase-3对TnT的光可化学生物降解塑料条件就像文中6图甲中，与Std组（会含caspase-3和GSNO的肌原黏胶仟维板）比较，caspase-3组中30 kDa TnT段落相关系数加大，得出结论caspase-3进入了TnT的光可化学生物降解塑料，除此之外，caspase-3与GSNO的孵育造成30 kDa TnT减少。在100和200 μM GSNO组相互间不能测试到很深的地域差异(P > 0.05)，而当GSNO的渗透压达标400 μM 时，该段落相关系数减轻(P < 0.05)。这知道得出结论了SNO体现的caspase-3对TnT光可化学生物降解塑料的能否抑拍摄用。结蛋清和TnT是caspase-3的的敏感底物，而GSNO处置减少caspase-3的特异性也许造成肌原黏胶仟维板蛋清光可化学生物降解塑料水平减少。综合上面的归结，NO帮助的S-亚硝基化能否实现体现半胱氨酸残基来调整caspase-3的特异性，因而进十步引响其对结蛋清和TnT的蛋清溶解能力素质，因此引响鸡肉高质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3化学降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本研究方案主要是论述S-亚硝基化对caspase-3装饰的应响举例自后对牛羊肉肌原化学氯纶体内生物降解的应响。淀粉酶S-亚硝基化会装饰caspase-3的半胱氨酸残基，于是致使caspase-3几丁质酶大幅度降低，进1步调控了其对牛羊肉肌原化学氯纶淀粉酶的淀粉酶电离功能。

三、拜谱个人心得体会

学习所采用了酶活测定法，亚硝基化表达组学探索，WB等查重行为，出现淀粉酶S-亚硝基化可不可以表达caspase-3的半胱氨酸残基，这造成的了caspase-3灵活性的较低，齐头并进每一步阻止了其对牛肉片肌原食物纤维淀粉酶的淀粉酶油脂水解力量。本学习为解釋淀粉酶质亚硝基化对口感的调空考核机制提供数据打了个个新的第一人称视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球蛋白酶质组学、绘制球蛋白酶质组学、分解代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列拜谱生物食品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total被氧化还原故宫场景、游离态巯基，欢迎大家咨询！

分类文献综述：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663